目的:观察黄芩提取化合物单体成分SBX对人NSCLC细胞系H1975和H1944细胞株增殖的影响,初步探讨SBX对NSCLC细胞系抑制的机制。方法:体外培养人H1975和H1944细胞株,以0、10、25、50、100和200μmol/L的SBX处理细胞,应用MTT法检测SBX对细胞增殖的影响,筛选出敏感细胞株。应用流式细胞术检测SBX对敏感细胞株细胞周期的影响,应用Protein Pathway Array技术检测SBX对敏感细胞株蛋白表达的影响。结果:SBX对两种类型的NSCLC细胞株均有抑制作用,并呈剂量依赖性,对H1975和H1944细胞株的IC50值分别为(38.3±1.25)和(62.5±1.76)μmol/L。SBX对H1975和H1944细胞抑制作用比较,对H1975细胞抑制作用更强,P<0.001。流式细胞术显示,SBX对H1975细胞周期的影响主要是引起G0/G1期阻滞和凋亡增加,与空白对照组相比,P<0.001。50和100μg/mL的SBX分别作用于H1975细胞后,阻滞在G0/G1期的细胞由35.47%分别升至54.36%和73.37%,S期的细胞由61.60%分别降至41.63%和19.14%。应用Protein Pathway Array技术分析SBX对H1975蛋白表达的影响显示,共检测166个磷酸化和非磷酸化蛋白,其中53个蛋白表达,有差异性表达的蛋白共15个。其中Cdk6、EGFR、Survivin和mTor蛋白表达水平上调,而p27、p-RB、Cyclin D1、Cyclin E、XIAP、p53、p-p53、p-AKT、Akt、Notch4和Cdk4蛋白表达水平下调。结论:SBX能够抑制人NSCLC细胞系H1975和H1944细胞株的增殖,敏感细胞株为H1975;SBX主要影响H1975的EGFR和Notch信号传导通路,并通过以上信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达水平的变化,导致细胞周期G0/G1期阻滞,凋亡增加。
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