目的研究靶向c-Myc和血管内皮生长因子(VEGF)基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒对人结直肠癌细胞株的影响。方法设计靶向c-Myc和VEGF的特异性siRNA。应用体内载体表达法合成其表达质粒,转染人结直肠癌细胞株Volo后,以Westernblot检测c-Myc和VEGF的蛋白表达;以MTT、流式细胞术、TUNEL染色分析、基质胶侵袭实验检测细胞增殖活性、凋亡特性、细胞周期分布及侵袭能力的改变。结果酶切及DNA测序证实c-Myc和VEGF的siRNA表达质粒均构建成功。转染细胞后,与对照组相比较,重组质粒组细胞c-Myc和VEGF的蛋白表达水平显著下调明显(均P<0.01)。重组质粒c-Myc组、VEGF组和c-Myc加VEGF组细胞增殖抑制率分别为(59.20±5.05)%、(32.31±3.48)%和(75.81±7.89)%;细胞凋亡率分别为(40.50±4.37)%、(21.30±2.98)%和(62.59±9.66)%,均显著高于对照组[细胞增殖抑制率(6.80±1.45)%;细胞凋亡率(2.90±0.36)%;均P<0.05]。重组质粒VEGF组和c-Myc加VEGF组的细胞侵袭率分别为(7.34±3.65)%和(2.80±1.02)%,明显低于对照组的(18.57±7.46)%(P<0.05)。其中,重组质粒c-Myc加VEGF组细胞增殖、调亡及侵袭性的改变最为显著,明显高于另外两个重组质粒组(均P<0.05)。结论特异性siRNA有效抑制了人结直肠癌Volo细胞c-Myc和VEGF的表达,从而抑制了肿瘤细胞的增殖活性和侵袭性,并诱导细胞凋亡,两者具有协同作用。
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