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解偶联蛋白嵌合体及突变体的构建方法期刊论文

编号：

97605a08-718d-453a-ad11-5f9d3890fe48
作者：

王超;刘洋;段秀梅;田庄;王银萍;沃夫冈·格莱尔;付彤;
地址：

吉林大学第一医院病理诊断中心;吉林大学第一医院眼科;奥地利格拉茨医科大学分子生物学与生物化学研究所;吉林大学第一医院乳腺外科;
语种：

中文
期刊：

吉林大学学报(医学版) ISSN：1671-587X 2013 年 39 卷 1 期 (174 - 179) ; 2013/1/28 0:00:00
收录：
关键词：

解偶联蛋白线粒体钙离子通道 uncoupling proteins mitochondria Ca2+ channel
摘要：

目的:构建解偶联蛋白(UCPs)嵌合体和突变体,为阐明解偶联蛋白家族功能结构域的研究提供条件。方法:采用普通PCR和重叠延伸PCR获得UCPs嵌合体基因片段,分别插入pCR2.1测序载体后进行测序,再以限制性内切酶连接方式将嵌合基因定向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1中,获得pcDNAUCP1UCP2、pcDNAUCP2UCP1和pcDNAUCP3UCP1,以PCR和酶切方法鉴定构建的重组真核表达质粒pcDNA。利用定向点突变产生pcDNA-UCP3R167G/pcDNA-UCP3RE171/172GG,并进行测序证实。结果:PCR和酶切,获得的目的基因与嵌合基因片段中包含的碱基数量吻合;测序结果,UCPs嵌合体基因序列、突变体基因序列与预期设计完全相同。结论:成功地构建了含有UCPs嵌合体和突变体基因重组真核表达质粒。
推荐引用方式
GB/T 7714：

王超,刘洋,段秀梅, 等. 解偶联蛋白嵌合体及突变体的构建方法 [J].吉林大学学报(医学版),2013,39(1):174-179.
APA：

王超,刘洋,段秀梅,田庄,&付彤.(2013).解偶联蛋白嵌合体及突变体的构建方法 .吉林大学学报(医学版),39(1):174-179.
MLA：

王超, et al. "解偶联蛋白嵌合体及突变体的构建方法" .吉林大学学报(医学版) 39,1(2013):174-179.

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解偶联蛋白嵌合体及突变体的构建方法 期刊论文

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