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rhTL1A基因原核表达载体的构建、表达与纯化  期刊论文  

  • 编号:
    9c55f405-826b-4567-bf83-e4301453eed8
  • 作者:
    杨立彬;李树蕾;谭岩;许淑芬;汪军;
  • 地址:
    吉林大学第一医院中心实验室,吉林大学基础医学院组织与胚胎学教研室,吉林大学第一医院中心实验室,吉林大学第一医院中心实验室,吉林大学第一医院检验科 吉林长春130021,吉林大学第一医院儿科,吉林长春130021,吉林长春130021,吉林长春130021,吉林长春130021,吉林长春130021
  • 语种:
    中文
  • 期刊:
    吉林大学学报(医学版) ISSN:1671-587X 2008 年 3 期 (415 - 419) ; 2008/5/28 0:00:00
  • 收录:
  • 关键词:
  • 摘要:

    目的:构建人肿瘤坏死因子样分子1A(TL1A)原核表达质粒并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人HUVECs总RNA经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TL1A基因,克隆到pTA2载体,酶切和测序鉴定正确后构建重组原核表达质粒pQE-TL1A,并转化大肠杆菌M15[pREP4]。IPTG诱导目的蛋白表达并进行Western blotting鉴定;镍离子亲和层析柱(Ni2+-NTA)纯化靶蛋白。结果:目的基因经酶切其结果与预期相符,测序结果显示目的基因与GenBank登录的序列(登录号AF520785)完全一致;工程化大肠杆菌M15[pREP4]经IPTG诱导表达相对分子质量约22 000的目的蛋白;Western blotting鉴定结果显示,重组蛋白能够与抗His单克隆抗体特异性结合。结论:成功地构建了重组原核表达质粒pQE-Tl1A,并纯化获得高纯度重组TL1A蛋白。

  • 推荐引用方式
    GB/T 7714:
    杨立彬,李树蕾,谭岩, 等. rhTL1A基因原核表达载体的构建、表达与纯化 [J].吉林大学学报(医学版),2008(3):415-419.
  • APA:
    杨立彬,李树蕾,谭岩,许淑芬,&汪军.(2008).rhTL1A基因原核表达载体的构建、表达与纯化 .吉林大学学报(医学版)(3):415-419.
  • MLA:
    杨立彬, et al. "rhTL1A基因原核表达载体的构建、表达与纯化" .吉林大学学报(医学版),3(2008):415-419.
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