[1]吉林大学第一医院肝胆胰外科
目的探讨肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3(A20)及受体作用蛋白(RIP)沉默增加肝癌细胞HepG2对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的分子机制。方法合成针对A20基因和RIP基因的特异性小干扰RNA(siRNA)并转染至肝癌细胞HepG2中,应用酸性磷酸酶(AP)法检测A20-siRNA或RIP-siRNA联合TRAIL对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用以及Western blot检测对半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8蛋白表达的影响。结果成功合成A20-siRNA和RIP-siRNA并转染入HepG2细胞中。A20-siRNA与TRAIL联合处理HepG2细胞可活化RIP、Caspase-8和Caspase-3,诱导细胞凋亡。RIP-siRNA联合TRAIL可以明显抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05)。另外RIP-siRNA联合TRAIL作用HepG2后可活化Caspase-8。结论 A20和RIP的表达是肝癌细胞对TRAIL耐受的主要原因,A20-siRNA或RIP-siRNA可以有效抑制肝癌HepG2细胞A20及RIP基因的表达,并增加TRAIL对肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用;其机制是通过"A20-RIP-Caspase-8"反应链序列调控活化下游Caspase-8,活化诱导的死亡受体传导通路来实现的。
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