目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对慢性环孢素A(CsA)肾毒性保护作用的分子机制。方法 ICR小鼠随机分为4组:(1)对照组:皮下注射橄榄油(1 ml·kg~(-1)·d~(-1))4周;(2) NAC对照组:皮下注射橄榄油(1 ml·kg~(-1)·d~(-1))和NAC(150 mg·kg~(-1)·d~(-1),1 g/L溶于饮用水中);(3)模型组:低盐饲料喂食下皮下注射CsA(30 mg·kg~(-1)·d~(-1))4周建立慢性CsA肾毒性小鼠模型;(4)治疗组:低盐饲料喂食下同时给予CsA(30 mg·kg~(-1)·d~(-1)皮下注射)和NAC(150mg·kg~(-1)·d~(-1)饮用水中)4周。检测各组小鼠的体质量、肾功能;Masson染色观察肾小管间质纤维化;酶联免疫吸附法测定尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG);免疫组化和Western印迹法分别检测抗衰老基因Klotho及其下游信号通路AKT-FoxO1的蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠肾功能下降[Scr(27.8±1.2)μmol/L比(19.0±2.2)μmol/L,P<0.01];肾小管间质带状纤维化;尿8-OHdG的排泄增加[(41.2±16.8)ng/d比(28.7±7.4)ng/d,P<0.05];Klotho蛋白表达减少[(17.8±4.5)%比(100.0±4.0)%,P<0.01]。与模型组比较,治疗组上述指标明显好转(均P<0.05)。直线相关分析示,Klotho蛋白的表达与尿8-OHdG水平(r=-0.934,P<0.01)和AKT-Fox01蛋白免疫活性(AKT:r=-0.939;Fox01:r=-0.919,均P<0.01)均呈负相关。结论 NAC对慢性环孢素A肾毒性具有保护作用,这种作用可能与上调Klotho基因表达、抑制AKT-Fox01信号通路有关。
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