本研究针对贵州省贵阳市一例疑似感染猫杯状病毒的加菲猫(雄性,未免疫)开展猫杯状病毒(FCV)分离鉴定及分子特性研究。经RT-PCR检测患猫眼鼻拭子,筛选FCV阳性样本,以CRFK细胞系培养分离病毒,结合间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR及VP1基因测序进行鉴定。结果显示:样本经RT-PCR初步检测为FCV阳性;接种24 h后观察到细胞圆缩、脱落及葡萄串样聚集的特征性细胞病变(CPE);IFA检测显示病毒培养物存在FCV特异性荧光信号;对VP1基因及氨基酸进行同源性分析,GY(23)1与CH-JL4(2015年吉林分离株)同源性最高,属于FCV GⅠ型;在GY(23)1株CRFK细胞上连续传代4代后仍维持稳定病变特征,第4代病毒滴度为10-8.7CID50/mL。本研究揭示了GY(23)1在CRFK细胞中的生物学特性并说明其与国内外流行株具有较高的遗传同源性。为FCV的分离鉴定及流行病学分析提供了数据支撑。